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摘要:
目的:构建表达人IL2-MUCI融合蛋白的工程菌,为制备新型MUCI疫苗提供实验依据.方法:通过PCR方法钓取人IL-2基因片段,将其克隆入pBS-SK-MUCI重组载体中,再将人IL2-M-UCI串联基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-I.将重组的pGEX-IL2-MUCI转化大肠杆菌BL-21,通过IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白.结果:经酶切及基因测序证实获得的IL-2基因片段402 bp及IL2-MUCI基因片段852 bp基因序列正确;构建的pGEX-IL2-MUCI表达载体在BL21大肠杆菌中成功表达GST-IL2-MUCI蛋白,经SDS-PAGE证实其相对分子质量为64 000,与理论预期值相符.Western blotting分析表明该表达产物与抗人MUCI多克隆抗体及抗人IL-2单克隆抗体均具有特异性结合能力.结论:成功构建表达人IL2-MUCl融合蛋白的工程菌,为进一步研究以人MUCI为靶点的新型抗肿瘤疫苗奠定基础.
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文献信息
篇名 重组人IL2-MUCl融合蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定
来源期刊 吉林大学学报(医学版) 学科 生物学
关键词 黏蛋白1 白细胞介素2 基因克隆 原核表达
年,卷(期) 2008,(5) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 763-766
页数 4页 分类号 Q78
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 柳忠辉 吉林大学基础医学院黏免疫学教研室 94 431 8.0 17.0
2 周静 吉林大学基础医学院黏免疫学教研室 22 77 5.0 8.0
3 方芳 吉林大学基础医学院黏免疫学教研室 36 199 7.0 12.0
4 赵小霞 吉林大学基础医学院黏免疫学教研室 8 34 3.0 5.0
5 马吉春 吉林大学基础医学院黏免疫学教研室 12 48 5.0 6.0
6 宋献美 吉林大学基础医学院黏免疫学教研室 9 25 3.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
黏蛋白1
白细胞介素2
基因克隆
原核表达
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期刊影响力
吉林大学学报(医学版)
双月刊
1671-587X
22-1342/R
大16开
吉林省长春市新民大街828号
12-23
1959
chi
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