OsMAPK4基因的原核表达及蛋白纯化

• 作者: 刘西燕 李杰 李莹 柏锡
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: OsMAPK4基因 原核表达 纯化 Westem Blot
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 59-63
• 页数: 5页
• 分类号: Q813
• 字数: 2674字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2008.08.013

摘要

构建OsMAPK4基因的原核表达载体,对表达产物进行鉴定和纯化,为转OsMAPK4基因植株后期的Western Blot检测提供抗原.用PCR方法从本实验室已构建的植物表达栽体pUM4上扩增OsMAP4基因,将其克隆至PET32b原核表达载体,构建重组栽体pET32b-MAPK4.转化大肠杆菌BL21,IPTG导表达后进行SDS-PAGE分析.用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,用Westem Blot进行蛋白鉴定.结果表明,原核表达裁体构建正确;SDS-PAGE分析及Western Blot鉴定中,均出现了与DNAMAN预测的43.6 ku大小一致的蛋白条带;得到纯化蛋白.成功构建了OsMAPK4基因的原核表达栽体,得到纯化蛋白,为转OsMAPK4基因水稻植株体内蛋白表达活性的检测提供了抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柏锡	东北农业大学生命科学学院	80	891	15.0	26.0
2	李杰	东北农业大学生命科学学院	193	1723	20.0	30.0
3	李莹	东北农业大学生命科学学院	23	109	7.0	10.0
4	刘西燕	东北农业大学生命科学学院	3	10	2.0	3.0