赖型钩端螺旋体溶血素基因HlyX的真核表达及基因免疫

• 作者: 商正玲 张会东 张英 钟琪 鲍朗 黄毕
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 溶血素基因HlyX 真核表达 基因免疫
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 134-138
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3847字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0254-5101.2008.02.012

摘要

目的 在哺乳动物细胞中表达含有赖型钩端螺旋体溶血素基因HlyX的重组质粒,并检测其作为DNA疫苗诱导小鼠体液免疫应答的效果.方法 以赖型钩端螺旋体全基因组为模板,PCR扩增出目的基因HlyX,以质粒pcDNA3.1为载体,双酶切构建重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,双酶切、PCR及测序鉴定重组质粒.将构建成功的重组质粒转染COS-7细胞,通过RT-PCR、Western blot鉴定目的基因的表达.将重组质粒免疫BALB/c小鼠,每两周1次,共3次,ELISA法检测小鼠的体液免疫应答水平.结果 扩增出全长约1100 bp的HlyX基因,重组质粒经双酶切、PCR及测序鉴定表明重组质粒构建成功.RT-PCR检测显示重组质粒转染组能扩增出约1100 bp的目的基因片段,Western blot分析可见在相对分子质量(Mr)40×103左右出现特异性的目的条带.DNA免疫后诱导小鼠产生了较高的抗体水平(1∶6561～1∶19 683).结论 赖型钩端螺旋体溶血素基因HlyX真核表达质粒能够诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体,为其作为钩体DNA疫苗的研究和开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	张会东	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	42	109	6.0	8.0
3	黄毕	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	13	11	3.0	3.0
4	钟琪	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	25	12	2.0	3.0
5	商正玲	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	16	13	2.0	2.0
6	张英	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	16	54	3.0	7.0