pCDNA3.1-Annexin A7载体的构建及在Hea-P细胞中的表达

• 作者: 唐建武 孙成荣 王志强 王波 王绍青
• 来源期刊: 大连医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 膜联蛋白A7 PCR 转染 肿瘤 淋巴道转移
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 305-309
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3647字
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建pCDNA3.1-Annexin A7载体并稳定转染Hca-P细胞.[方法]提取小鼠总RNA,逆转录成cD-NA,PCR扩增,获取Annexin A7 CDS,将PcDNA3.1(+)质粒和Annexin A7 CDS片段行BamH I和EcoR I双酶切,构建并抽提pCDNA3.1-Annexin A7质粒,测序鉴定后转染Hca-P细胞,经400 μg/mL G418完全培养基筛选获得pCDNA3.1-Armexin A7载体稳定转染的Hca-P细胞,在蛋白质水平检验Annexin A7的表达并行基因组DNA鉴定.[结果]成功构建pCDNA3.1-Annexin A7载体,经测序鉴定,所得到的载体中的CDS经比对与库中序列一致.pCDNA3.1-Annexin A7载体转染Hca-P细胞后,获得稳定上调表达Annexin A7的Hca-P细胞株;行基因组DNA鉴定,证实pCDNA3.1-Annexin A7已转入Hca-P细胞中,western-blotting结果显示转染前后蛋白的表达相对值Annexin A7/GAPDH分别为0.43544±0.0112和0.45957±0.0065(P＜0.05).[结论]pCDNA3.1-Annexin A7的构建并稳定转染Hca-P细胞成功,为通过上调Annexin A7在Hca-P的表达以证实Annexin A7与恶性肿瘤淋巴道转移潜能关系的相关研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王波	大连医科大学病理学与法医学教研室	81	507	11.0	17.0
2	唐建武	大连医科大学病理学与法医学教研室	96	679	14.0	22.0
3	王志强	大连医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	16	104	6.0	10.0
4	王绍青	大连医科大学病理学与法医学教研室	2	28	2.0	2.0
5	孙成荣	大连市第五人民医院肿瘤科	3	28	2.0	3.0