TIMP-4基因的克隆、原核表达及活性测定

• 作者: 吴春雷 杨胜武 林利兴 滕红林 陈雷 魏海峰
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: TIMP-4基因 克隆 基因表达 免疫活性
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3348字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2008.01.008

摘要

目的:采用RT-PCR法获取TIMP-4基因,并通过原核表达获取具有生物活性的TIMP-4融合蛋白.方法:从SD大鼠心肌组织中提取总RNA,利用RT-PCR法扩增出TIMP-4基因,经基因序列分析后构建表达载体PET-28a(+)-TIMP-4,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导TIMP-4的表达.利用N2+-NTA纯化和复性后,根据其骨肉瘤细胞迁移能力的影响检测其活性.结果:克隆到编码序列完全正确的大鼠TIMP-4基因,能在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物占全菌总蛋白的23.5%,N2+-NTA纯化和复性后,纯度达90%以上.纯化后的融合蛋白使骨肉瘤细胞株的迁移能力得到显著抑制.结论:通过基因克隆和原核表达的方式可以大量获得具有生物活性的TIMP-4融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	滕红林	温州医学院第一附属医院骨科	87	491	12.0	15.0
2	吴春雷	温州医学院第一附属医院骨科	41	252	10.0	13.0
3	陈雷	温州医学院第一附属医院骨科	62	309	10.0	14.0
4	杨胜武	温州医学院第一附属医院骨科	43	406	10.0	18.0
5	魏海峰	南通医学院附属泰州医院骨科	1	0	0.0	0.0
6	林利兴	温州医学院第三附属医院骨科	4	20	2.0	4.0