胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体的构建

• 作者: 周旭宇 李刚 李铁军 王军 胡先贵 金钢
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: SLOOP基因 慢病毒 胰腺肿瘤 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 1230-1233
• 页数: 4页
• 分类号: R735.9
• 字数: 3116字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2008.10.021

摘要

目的:构建胰腺癌新基因SLOOP与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体.方法:实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得SlOOP的全外显子片段.使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿棱质粒共转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定.取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和宿主胰腺癌细胞.荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达,RT-PCR鉴定胰腺癌细胞中SLOOP的表达水平.结果:电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的S LOOP基因序列完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞.荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光.共转染后293T细胞上清可高效感染293T细胞,感染后宿主细胞中S LOOP高表达.结论:成功构建了S LOOP与GFP融合基因慢病毒表达载体,为进一步研究SLOOP基因的相关功能提供了适合的稳定转染载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王军	第二军医大学药学院药理学教研室	44	146	7.0	9.0
2	胡先贵	第二军医大学长海医院普通外科	114	676	14.0	18.0
3	金钢	第二军医大学长海医院普通外科	78	437	11.0	16.0
4	李铁军	第二军医大学药学院药理学教研室	56	524	14.0	21.0
5	李刚	第二军医大学长海医院普通外科	22	115	4.0	10.0
6	周旭宇	第二军医大学长海医院普通外科	19	51	4.0	6.0