GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用

• 作者: 吴明媛 姜俊芬 林小娟 赵梅 郭凌晨 韩伟 黄薇薇
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: GST-hDSL Notch通路 造血祖细胞
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 612-615,607
• 页数: 5页
• 分类号: Q291
• 字数: 5052字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2008.04.004

摘要

目的:原核表达DSL与谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白并研究观察GST-hDSL对人脐带血CD34+造血祖细胞的体外扩增作用.方法:将人DSL cDNA的蛋白编码序列克隆入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌DH5α中诱导表达融合蛋白,用DEAE阴离子交换柱纯化目的蛋白.然后分离、纯化脐带血CD34+造血祖细胞,不加细胞因子或加入SCF(干细胞生长因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),经过14天的培养,检测GST-hDSL对细胞总数、CD34+细胞百分率、以及集落形成的影响.结果:当SCF和GM-CSF存在时,GST-hDSL组的CD34+细胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)数以及高增值潜能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)数分别是时照组的1.9、1.2、5.3倍.结论:当与SCF和GM-CSF联合作用时,重组GST-hDSL蛋白对造血祖细胞具有扩增作用.