Smad家族成员2/3/4原核表达载体构建和融合蛋白纯化

• 作者: 刘刚 李春艳 林子英 潘展春 邹宝安
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: Smad家族 克隆 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 250-253
• 页数: 4页
• 分类号: R575.5
• 语种: 中文

摘要

目的 构建针对Smad家族相关系列原核表达载体,观察其相应蛋白诱导表达纯化情况.方法 PCR扩增Smad2/3/4全长及截短片段,定向插入pGEX-6P-1载体中,构建原核表达重组质粒pGEX-6P-1-Smad2/3/4.经酶切和测序正确后,重组质粒转化表达菌株BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达;上清经GST-Sepharose4B亲和纯化,SDS-PAGE考-马斯亮蓝染色鉴定.结果 原核表达载体pGEX-6P-1-Smad2/3/4构建成功,SDS-PAGE证实Smad3A和Smad4存在包涵体,而上清中GST-Smad3(B-D)和GST-Smad2可被纯化.结论 构建的融合蛋白原核表达载体通过诱导和纯化后得到GST-Smad3截断融合蛋白(B-D)和GST-Smad2.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹宝安	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	2	2	1.0	1.0
2	刘刚	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	10	18	3.0	3.0
3	林子英	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	4	7	1.0	2.0
4	李春艳	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	5	5	1.0	1.0
5	潘展春	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	1	0	0.0	0.0