C型口蹄疫病毒型特异性抗原的表达与鉴定

• 作者: 丛国正 宋帅 常惠芸 林彤 独军政 谢庆阁 邵军军 高闪电
• 来源期刊: 农业科学与技术（英文版）
• 学科: 农学
• 关键词: C型口蹄疫病毒 血清学 交叉反应 血清分型
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 79-81,95
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 528字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4229-B.2009.05.019

摘要

[目的]为C型FMDV型特异性多克隆抗体、单克隆抗体的制备和FMDV定型提供理论依据.[方法]以含有C型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白基因VP1的重组质粒pGEM-CP1为模板,设计特异性表达引物,扩增VP1及其C端编码区.对C型口蹄疫病毒VP1及其C端进行原核表达,并测定反应原性.利用纯化的C型VP1及其C端融合蛋白建立间接ELISA,分别对O、A、C、Asia 1四型豚鼠阳性血清进行检测,确定C型VP1及其C端与其他3型FMDV抗体的型间交叉反应性.[结果]构建了pPRO-CVP1、pPRO-CVP1c重组原核表达质粒,实现了C型口蹄疫病毒VP1及其C端的高效表达,目的蛋白的分子量大小分别为33 kD和20 kD.Western blot显示,VP1及其C端融合蛋白均可与对应血清型的豚鼠阳性血清反应.C型VP1及其C端与其他血清型的FMDV阳性血清均未发生交叉反应,且以VP1 C端的型特异性最好.[结论]获得了C型FMDV特异性抗原.