小鼠PDL<em>1</em>胞外区的克隆、表达及生物学效应研究

• 作者: 刘朝奇 史继静 吕佰瑞 周永芹 李斌 杨凡 覃晓琳
• 来源期刊: 实用医学进修杂志
• 关键词: mPDL-1IgV 重组蛋白 纯化 生物学活性
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 学术窗口
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆小鼠PDL1膜外区(简称mPDL-1IgV)基因,构建原核表达载体,检测其表达和生物学活性.方法:提取小鼠脾细胞总RNA,采用RT-PCR克隆mPDL-1IgV基因,并将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建原核表达质粒pET28a(+)/rap.DL-1IgV,转化大肠杆菌DH5et,进行PCR和双酶切鉴定,并测序.筛选阳性菌落,提取质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Westemblot检测分析,同时纯化mPDL-1 IgV蛋白,进行生物学活性检测.结果:从小鼠脾细胞总RNA中成功获得mPDL-1IgVcDNA克隆,重组质粒pET28a(+)/mPDL-1IgV构建正确.转化pET28a(+)/mPDL-1 IgV的E.coli BL21(DE3)成功诱导性表达重组小鼠PDL-1胞外区蛋白,并纯化mPDL-1IgV蛋白,对其进行了复性和浓缩,复性后的蛋白显示出良好的生物学活性.结论:成功地克隆、表达和纯化了小鼠PDL1胞外区蛋白,为进一步研究其功能提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周永芹	三峡大学分子生物学研究所	33	330	8.0	18.0
2	刘朝奇	三峡大学分子生物学研究所	171	552	10.0	15.0
3	史继静	三峡大学分子生物学研究所	19	94	6.0	9.0
4	杨凡	三峡大学分子生物学研究所	22	47	4.0	6.0
5	覃晓琳	三峡大学分子生物学研究所	23	62	4.0	7.0
6	李斌	三峡大学分子生物学研究所	20	89	4.0	9.0
7	吕佰瑞	三峡大学分子生物学研究所	14	30	3.0	5.0