Asia1型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

• 作者: 张中旺 张昱 张永光 潘丽 王永录
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 口蹄疫病毒 衣壳蛋白前体P1 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 973-976
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 3254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.10.012

摘要

目的 原核表达口蹄疫病毒Asia1/HeB株衣壳蛋白前体P1基因并纯化.制备其兔多克隆抗体并进行鉴定.方法 从重组克隆载体pGEM-P1中扩增编码P1区结构蛋白的基因片段.并克隆入原核表达载体pET-28a(+)中.原核表达与蛋白纯化后,免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清.抗体效价及特异性检测分别用间接ELISA和Western blot法鉴定.结果 在大肠杆菌中成功表达了分子量约为80.475 kDa的P1蛋白.ELISA法检测抗血清的效价可达到1∶25 600,Western blot分析抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合.结论 在大肠杆菌中成功表达了口蹄疫病毒Asia1/HeB株衣壳蛋白前体,并制备了P1衣壳蛋白前体的抗血清,为进一步研究P1区结构蛋白的结构、功能以及抗原表位的确定奠定了基础.