中国人常见GJB2基因突变片段TA克隆载体构建

• 作者: 刘金伟 孙玉蕊 张元丁 张宗霖 张延平 李丽娜 祝威 邓惠严 马磊
• 来源期刊: 中国听力语言康复科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缝隙连接蛋白26 突变 TA克隆载体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 13-16
• 页数: 4页
• 分类号: R764.5
• 字数: 2729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4933.2009.01.002

摘要

目的 应用TA克隆技术构建含中国人常见GJB2基因突变片段的载体,为构建突变绿色荧光蛋白融合载体提供基础.方法 首先利用定点诱变法在体外构建235delC、299-300delAT和176del16bp绿色荧光蛋白非融合载体,以此为模板利用PCR扩增突变基因片段,然后将PCR扩增产物克隆到TA载体上,用限制性内切酶法和测序法鉴定重组质粒序列正确性.结果 用限制性内切酶法和测序方法 证实扩增片段为目的片段.结论 成功地构建了235delC、299-300delAT和176del16bp突变基因片段TA克隆载体,为构建突变绿色荧光蛋白融合载体、进一步研究突变致聋机制奠定了基础.