人FHIT基因的克隆及其真核表达质粒的构建

• 作者: 孙政 彭燕 曹杰 李旺林 杨平 王强 钱跃军
• 来源期刊: 岭南现代临床外科
• 学科: 医学
• 关键词: 脆性组氨酸三联体 真核表达载体 基因克隆
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 331-334
• 页数: 4页
• 分类号: R735.3
• 字数: 2951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2009.05.004

摘要

目的 克隆人脆性组氨酸三联体(FHIT)基因,构建其真核表达质粒pRcCMV-FHIT.方法 提取人外周血总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增人FHIT cDNA全长开放阅读框序列,PCR产物与中间载体pGEM-T连接后转化到大肠杆菌DH5α,然后对单菌落进行菌落PCR、限制性内切酶酶切鉴定和测序.用EcoR Ⅰ将目的片段切下,插入真核表达载体pRc/CMV2的相应位点.构建表达质粒pRc/CMV2-FHIT,将该重组质粒转化到大肠杆菌DIL5α后进行菌落PCR、酶切鉴定.结果 测序结果表明从正常人外周血单个核细胞中所获得的FHITcDNA含有781个碱基,与Genbank(NM_002012.1)序列完全一致.pRc/CMV2-FHIT经酶切鉴定与预期结果一致.结论 成功构建重组真核表达质粒pRcCMV-FHIT,为进一步研究脂质体转染FHIT基因对结肠癌细胞株SW480凋亡作用的影响奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨平	广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科	40	222	8.0	12.0
2	曹杰	广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科	59	318	9.0	13.0
3	钱跃军	广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科	4	10	2.0	3.0
4	彭燕	广州医学院实验医学研究中心	16	50	4.0	6.0
5	孙政	广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科	19	108	7.0	9.0
6	李旺林	广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科	35	172	7.0	11.0
7	王强	广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科	11	27	4.0	5.0