胆汁三烯结合蛋白在大肠杆菌中的表达、复性与纯化

• 作者: 宁保安 左佳 李晓芳 杨丽丽 王彩红 胡红芳 高志贤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 胆汁三烯结合蛋白 大肠杆菌 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 191-194
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.02.012

摘要

目的:合成胆汁三烯结合蛋白(BBP)基因并在大肠杆菌中表达,获得重组BBP纯化制品.方法:根据天然BBP的基因序列和大肠杆菌偏好密码子设计并合成BBP基因的引物,PCR扩增优化的BBP基因序列,克隆至载体pEasy-T3;测序正确后,将该序列克隆至表达载体pET-32a上,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,在IPTG诱导下表达融合蛋白;采用Ni柱纯化融合蛋白.结果:PCR扩增获得了优化后的BBP基因序列,构建了表达载体pET-32a-BBP;SDS-PAGE分析表明表达的融合蛋白相对分子质量为20×103,以包涵体形式存在,占全菌蛋白的40%以上;变性、复性后经Ni2+柱纯化,获得纯度达98%以上的重组蛋白.结论:优化并合成了BBP全基因序列,获得了高纯度重组融合蛋白,为进一步鉴定其生物活性及筛选小分子的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁保安	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	34	101	5.0	8.0
2	高志贤	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	135	1451	21.0	32.0
3	李晓芳	华中农业大学食品科技学院	2	3	1.0	1.0
4	胡红芳	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	2	3	1.0	1.0
5	杨丽丽	华中农业大学食品科技学院	2	3	1.0	1.0
6	左佳	华中农业大学食品科技学院	2	3	1.0	1.0
7	王彩红	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	1	2	1.0	1.0