Golph2蛋白质的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 厉倩 叶寒清 孔宪涛 王皓 谭龙益 陈洁 顾继安
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Golph2蛋白质 多克隆抗体 蛋白质表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 443-445,449
• 页数: 4页
• 分类号: R562
• 字数: 2905字
• 语种: 中文

摘要

目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础.方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1 206 bp),将其插入至原核表达载体pET-21、转化大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE鉴定.将纯化蛋白质免疫家兔,制备多克隆抗血清.建立Western blot 鉴定重组蛋白和抗血清特异性,测定临床血清标本中Golph2蛋白水平.结果:从肝癌细胞中钓取的基因,出现2个碱基置换突变和1个碱基缺失突变,经回复突变,获得与NM 177937完全一致序列.SDS-PAGE和Western blot证实,重组Golph2蛋白质与预期结果一致.抗血清能够特异地识别52 kD重组蛋白质和73 kD血清蛋白质.结论:Golph2蛋白质表达和抗血清制备完全成功,可以用于后续研究

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洁	第二军医大学附属长征医院实验诊断科	92	515	11.0	18.0
2	孔宪涛	第二军医大学附属长征医院实验诊断科	124	1102	16.0	29.0
3	王皓	第二军医大学附属长征医院实验诊断科	72	476	11.0	18.0
4	谭龙益	上海市第一人民医院宝山分院医学检验科	20	118	5.0	10.0
5	厉倩	上海市第一人民医院宝山分院医学检验科	19	77	5.0	8.0
6	叶寒清	第二军医大学附属长征医院实验诊断科	2	20	1.0	2.0
7	顾继安	上海市第一人民医院宝山分院医学检验科	7	29	2.0	5.0