含结核分枝杆菌ESAT6和CFP10基因的重组腺病毒表达载体的构建

• 作者: 房红莹 王蕾 罗满林 邓碧亮 顾冠彬
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 ESAT-6 CFP-10 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 24-28
• 页数: 5页
• 分类号: R378.91+1
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆结核分枝杆菌的ESAT-6和CFP-10基因,构建能同时表达两基因的重组腺病毒活载体,为研制能有效防治结核病的重组腺病毒活载体疫苗打下基础.方法 首先利用PCR技术克隆结核分枝杆菌的ESAT-6和CFP-10基因,将两者通过IRES串连插入腺病毒转移载体中,构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-ESAT-6-IRES-CFP-10.该穿梭质粒转化含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,经间源重组获得复制缺陷型重组腺病毒载体pAdeasy-1-pShuttle-CMV-ESAT-6-IRES-CFP-10.PacI酶切线性化该质粒,转染AD293细胞进行病毒包装.结果 ESAT-6和CFP-10基因成功克隆,其序列与GenBank公布的一致.两者通过IRES串连插入腺病毒转移载体,获得的重组穿梭质粒经同源重组,成功获得复制缺陷型重组腺病毒质粒Adeasy-1-pShuttle-CMV.ESAT-6-IRES-CFP-10,转染该质粒的AD293细胞出现细胞病变效应.结论 成功克隆了分枝杆菌的ESAT6和CFP-10基因,构建了含IRES串连的ESAT-6和CFP-10基因的重组腺病毒,为重组病毒活载体疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	房红莹	苏州大学医学部病原生物学系	19	63	5.0	7.0
2	顾冠彬	苏州大学医学部病原生物学系	25	77	5.0	7.0
3	罗满林	华南农业大学兽医学院	111	453	11.0	14.0
4	王蕾	苏州大学医学部病原生物学系	46	145	7.0	9.0
5	邓碧亮	华南农业大学兽医学院	1	0	0.0	0.0