鸡贫血病毒VP1、VP2和VP3基因酵母双杂交载体的构建及其自激活活性的鉴定

• 作者: 孙芬芬 潘伟 王笑梅 祁小乐 高宏雷 高玉龙
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡贫血病毒 蛋白相互作用 酵母双杂交载体 自激活作用
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 111-115
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

为构建鸡贫血病毒(CAV)VP1、VP2、VP3基因酵母双杂交载体并鉴定其自激活作用,从CAV细胞传代毒M9905毒株中提取基因组DNA,利用PCR分别扩增VP1、VP2和VP3基因,采用Gateway技术将VP1、VP2和VP3基因分别克隆到酵母双杂交栽体pDEST32和pDEST22中,构建了诱饵载体及猎物载体,经酶切和PCR鉴定且测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株Mav203,通过缺陷型平板SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-Ura筛选以及LacZ报告基因检测载体有无自激活作用.结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST32-VP1/VP2/VP3和捕获载体pDEST22-VP1/VP2/VP3,并证明其VP1、VP2和VP3蛋白在酵母双杂交系统中无自激活作用.研究结果为下一步利用酵母双杂交系统探索CAV VP1、VP2、VP3蛋白之间的相互作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王笑梅	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	65	361	12.0	16.0
2	高宏雷	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	29	190	8.0	13.0
3	高玉龙	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	40	203	7.0	13.0
4	祁小乐	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	17	57	4.0	7.0
5	潘伟	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	5	33	2.0	5.0
6	孙芬芬	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	3	1	1.0	1.0