刺桐胰蛋白酶抑制剂的高效表达、纯化、亲和介质的制备及其在r-PA纯化中的应用

• 作者: 包永照 孙丽霞 徐同文 王庆民 王晶翼 米凤景 魏丽冬
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI) 亲和层析介质 r-PA
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 283-286
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,能够特异性结合胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂,抑制其活性.因此ETl可以作为配体与固定相偶联制备亲和层析介质,用于tPA(组织型纤溶酶原激活剂)及其突变体的纯化.利用基因工程方法构建了ETI的高表达工程菌株,诱导表达后目的蛋白占总蛋白的39.6%,经包涵体变性、复性、纯化,制备了纯度高于96%的ETI样品,收率达到了63.5%.利用纯化的ETI,偶联制备了亲和层析介质,偶联率达到99%.用制备的ETI亲和层析介质纯化瑞替普酶(r-PA),获得的r-PA样品纯度高于95%,生物学活性高于5×105U/mg.本研究为ETI的进一步生产及应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙丽霞		6	15	3.0	3.0
2	王晶翼		14	25	4.0	4.0
3	魏丽冬		1	0	0.0	0.0
4	王庆民		7	14	3.0	3.0
5	徐同文		1	0	0.0	0.0
6	米凤景		1	0	0.0	0.0
7	包永照		1	0	0.0	0.0