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癌钙调蛋白/鱼精蛋白截短体融合基因在原核表达载体中的构建及鉴定
癌钙调蛋白/鱼精蛋白截短体融合基因在原核表达载体中的构建及鉴定
作者:
崔志利
朱彤
石燕红
胡丹
薛铮
马丽娜
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
癌钙调蛋白
鱼精蛋白
融合基因
原核表达
摘要:
目的 在原核表达载体中构建癌钙调蛋白(OM)/鱼精蛋白截短体(tp)融合基因,进行基因测序鉴定.方法 提取SD大鼠腹腔巨噬细胞,并进行细胞计数,经巨噬细胞特异性抗体CD68鉴定.设计引物扩增OM基因,并在其3'端引入tp的编码基因,经PCR扩增获得OM/tp融合基因,通过中间载体PUC57进行目的基因克隆,将阳性克隆质粒酶切,与原核表达载体PET32a连接,转化大肠杆菌感受态细胞,筛选阳性克隆,小量提取质粒,送样经公司测序鉴定.结果 琼脂糖凝胶电泳获得OM/tp目的基因,与预期的目的基因大小一致,回收目的基因与中间载体PUC57连接转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后,菌检PCR获得约500bp的阳性克隆,与预期大小一致.抽提质粒PUC57-OM/tp,经测序鉴定后与预期的序列一致.质粒PUC57-OM/tp酶切后与载体PET32a连接转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,菌检PCR获得约500 bp的阳性克隆,与预期大小一致.抽提质粒PET32a-OM/tp经测序后与预期的序列一致.结论 OM/tp融合基因的成功构建,为该融合蛋白促进视神经损伤后再生的研究奠定了基础.
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文献信息
篇名
癌钙调蛋白/鱼精蛋白截短体融合基因在原核表达载体中的构建及鉴定
来源期刊
眼科研究
学科
医学
关键词
癌钙调蛋白
鱼精蛋白
融合基因
原核表达
年,卷(期)
2010,(5)
所属期刊栏目
实验研究
研究方向
页码范围
401-405
页数
分类号
R774.03
字数
3760字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1003-0808.2010.05.006
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
胡丹
第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所
44
228
9.0
12.0
2
崔志利
第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所
12
74
5.0
8.0
3
石燕红
第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所
2
2
1.0
1.0
4
朱彤
第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所
3
5
2.0
2.0
5
马丽娜
第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所
7
14
2.0
3.0
6
薛铮
第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所
1
2
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1.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
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1979(1)
参考文献(1)
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1981(1)
参考文献(1)
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2013(1)
引证文献(0)
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2014(1)
引证文献(1)
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研究主题发展历程
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鱼精蛋白
融合基因
原核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华实验眼科杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
2095-0160
CN:
11-5989/R
开本:
大16开
出版地:
郑州市纬五路7号河南省眼科研究所&河南省立眼科医院院内
邮发代号:
36-13
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
6131
总下载数(次)
29
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