乳糖诱导的重组人血管内皮抑素(rhEndostatin)蛋白的表达

• 作者: 储平 戴清源 李婉珍 薛正莲 陈涛
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮抑素 IPTG 乳糖 诱导剂
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 62-66
• 分类号: R3
• 字数: 3300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2010.02.014

摘要

研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组蛋白的表达, 观察乳糖对乳糖操纵子调控的基因工程菌发酵及重组血管内皮抑素表达的影响,从而选取最佳诱导表达条件.以重组人血管内皮抑素表达工程菌pETrhEN/BL21(DE3)作为研究对象,分别用IPTG和乳糖作为诱导剂, 在摇瓶中进行表达实验.并对重组蛋白质表达量进行分析.然后在5 L发酵罐中进行验证.在摇瓶培养条件下,乳糖浓度大于0.5 g /L即可以诱导目的蛋白的表达.乳糖浓度1 g/L时诱导目的蛋白表达量与1 mmol/L的 IPTG相当,当乳糖浓度为10 g/L,目的蛋白表达量达到最大.在发酵罐培养条件下,补料4 h后葡萄糖浓度基本耗尽,此时开始加入乳糖.诱导后1 h,即有重组蛋白表达,在诱导后4 h达到高峰(占菌体可溶性蛋白的56%),与此同时,诱导后5 h菌体浓度也达到最高值.在以乳糖操纵子为调控手段的工程菌表达系统中,可以使用乳糖作为诱导剂,诱导应在葡萄糖消耗完后进行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛正莲	安徽工程科技学院生物化学工程系	152	710	15.0	17.0
2	陈涛	安徽工程科技学院生物化学工程系	19	57	5.0	7.0
6	储平	南京大学生命科学院	3	23	2.0	3.0
7	戴清源	安徽工程科技学院生物化学工程系	22	74	5.0	7.0
8	李婉珍	安徽工程科技学院生物化学工程系	36	85	5.0	7.0