NOD1真核表达质粒的构建及表达

• 作者: 何湘 刘大伟 姜铮 王雪松 甄清 袁静 郭燕红 陈宣男
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: NOD1 NF-κB 真核表达 萤光素酶报告基园
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 184-187
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.02.009

摘要

目的:构建天然免疫胞内识别受体核苷酸寡聚域1(NOD1)真核表达质粒.方法:MOD1基因片段经PCR扩增获得,经酶切后连接到真核表达载体pcDNA3/flag中,对挑选出的阳性克隆测序,将序列正确的重组质粒pflagNOD1转染293T细胞,用Western印迹检测目的蛋白的表达,同时用NF-KB的萤光素酶报告基因检测NOD1蛋白的活性.结果:pflag-NOD1可以在真核细胞293T中表达,并可以增强NF-κB报告基因的转录活性.结论:构建了重组质粒pflag-NOD1,在细胞中表达NOD1后能够提高NF-KB转录的生物活性,为进一步研究NOD1的功能奠定了基础.