GST-UCP2-N和GST-UCP2-C原核表达载体的构建表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 刘丹青 卞桢 曾科 白蕊 郭亚楠
• 来源期刊: 南京大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 解偶联蛋白2(UCP2) 表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 192-196
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3832字
• 语种: 中文

摘要

以pMD18-T-hucp2为模板,用设计的两对特异性的引物PCR得到hucp2cDNA N端和C端的两断基因片段,然后将其插入到pGEX-5X-1表达载体上,重组质粒在PCR、双酶切、测序鉴定后,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21表达大量融合蛋白GST-UCP2-N(C),经GST亲和层析纯化蛋白.以该蛋白为抗原免疫ucp2基因敲除小鼠,western blot鉴定血清中抗体的反应性.实验证明成功构建了构建pGEX-5X-1-UCP-N(C)重组质粒,表达出了融合蛋白.并获得了抗血清.为进一步获得灵敏性更高,特异性更强的UCP2的抗体打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白蕊	南京大学生物化学与分子生物学系	1	0	0.0	0.0
2	郭亚楠	南京大学生物化学与分子生物学系	1	0	0.0	0.0
3	卞桢	南京大学生物化学与分子生物学系	1	0	0.0	0.0
4	刘丹青	南京大学生物化学与分子生物学系	2	0	0.0	0.0
5	曾科	南京大学生物化学与分子生物学系	10	23	3.0	4.0