构建重组人CatSperl特异抗原原核表达载体

• 作者: 关艺青 潘善培 禹艳红 黄丹
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: CatSper 1 精子 免疫避孕 重叠PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 130-135
• 分类号: R715.2
• 字数: 5154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2010.02.006

摘要

目的:构建重组人Catsper1特异抗原(含胞外区、钙选择孔区和破伤风类毒素通用T细胞表位TT580-590)原核表达载体并表达重组抗原.方法:设计引物,以RT-PCR法扩增人CatSper1的整个跨膜区DNA片段,利用重叠PCR方法合成重组人CatSper1特异抗原DNA片段,并插入到pET-21b和pET-21b-Trx(硫氧还蛋白)的原核表达载体.测序鉴定后转化工程菌株E. coli BL21(DE3)进行诱导表达,并纯化表达的重组蛋白.用TricineSDS-PAGE和Western blotting分析重组蛋白的表达情况.结果:成功构建pET-21b-Catsper1特异抗原和pET-21b-Trx-Catsper1特异抗原原核表达载体,并在BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白.Tricine-SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明,已获得重组人CatSper1特异抗原包涵体和纯化的可溶重组Trx-Catsper1特异抗原.结论:成功在原核表达系统表达重组人Catsperl特异抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘善培	暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所	32	144	7.0	9.0
2	黄丹	暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所	15	80	5.0	8.0
3	关艺青	暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所	5	15	2.0	3.0
4	禹艳红	暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所	5	14	2.0	3.0