重组人半乳凝集素-1的原核表达、纯化及生物活性检测

• 作者: 侯建伟 张伟 张英起 徐玉金 李晶 舒震 贺丽清 陈霖
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人半乳凝集素-1 原核表达 纯化 红细胞凝集
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 315-318
• 分类号: Q78
• 字数: 3193字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.004

摘要

目的:在大肠杆菌中表达半乳凝集素-1(galectin-1),并进行纯化及生物活性检测.方法:将人半乳凝集素-1基因克隆至带有His融合标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western印迹鉴定,并用红细胞凝集试验检测其生物学活性.结果:双酶切鉴定和核苷酸序列测定表明重组表达质粒pQE-30-Galectin-1构建正确;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的50%,主要以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度达95%以上,且具有良好的红细胞凝集活性.结论:在大肠杆菌中表达了重组人半乳凝集素-1,且具有良好的生物活性.