磷酸丝氨酸转氨酶(serC)基因的克隆与原核表达

• 作者: 包慧芳 周亚飞 杨慧 王宁 王炜 赵忠润
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: serC基因 pEC7 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 2505-2509
• 分类号: S188+.2
• 字数: 2519字
• 语种: 中文

摘要

[目的]检测磷酸丝氨酸转氨酶(serC)基因在大肠杆菌中能否高效表达.[方法]根据GenBank所公布的serC基因序列设计一对特异性引物,以E.coliJM109基因组为模板PCR扩增目的基因片段,将得到的目的基因定向克隆至大肠杆菌/黄色短杆菌穿梭表达载体pEC7中,构建重组表达载体并转化宿主菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析.[结果]通过PCR扩增得到约1 100 bp的DNA片段,经测序后分析该基因与已发表的serC基因具有99.27%的同源性;对重组表达载体进行酶切和PCR方法鉴定正确的命名为pEC7- C;重组表达载体转化宿主菌,SDS-PAGE分析可见约41 kD与理论大小一致的目标蛋白条带.[结论]重组表达载体转化后E.coli BL21中蛋白表达量比原始菌株的蛋白表达量高,证明 serC基因在E.coli BL21(DE3)中成功表达,为进一步构建L-丝氨酸高产基因工程菌奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包慧芳	新疆农业科学院微生物应用研究所	24	102	7.0	8.0
2	王宁	新疆农业科学院微生物应用研究所	26	280	8.0	16.0
3	王炜		12	74	6.0	8.0
4	赵忠润	石河子大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
5	周亚飞	石河子大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
6	杨慧	石河子大学生命科学学院	3	5	2.0	2.0