miR-1腺病毒载体的构建及表达分析

• 作者: 宋晓伟 李青 林丽 秦永文 荆清 袁文俊 许旭东
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌细胞 腺病毒 microRNAs miR-1
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 1-3,7
• 分类号: R542.2
• 字数: 2404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2294.2010.08.001

摘要

目的 构建并鉴定microRNA-1(miR-1) 的腺病毒表达载体.方法 PCR扩增含大鼠miR-1前体的DNA片断,并将其克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack.pAdTrack经Pme I酶切线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183菌中进行同源重组.重组质粒pAd-precusor-miR-1线性化后,转染293A细胞,进行病毒包装,得到重组腺病毒颗粒Ad-miR-1.Ad-miR-1与Ad-GFP病毒转染培养的乳鼠心肌细胞,通过实时荧光定量PCR方法检测miR-1的表达效率.结果 基因测序及酶切鉴定证实重组Ad-precursor-miR-1腺病毒载体构建成功;腺病毒Ad-miR-1转染心肌细胞后,实时荧光定量PCR方法证实腺病毒Ad-miR-1能够显著提高心肌细胞内miR-1的表达水平.结论 利用同源重组的方法构建的miR-1腺病毒能够提高心肌细胞内miR-1的表达水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦永文	第二军医大学长海医院心血管内科	411	2004	19.0	26.0
2	李青	中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所	142	948	15.0	24.0
3	袁文俊	第二军医大学生理学教研室	65	532	11.0	21.0
4	林丽	第二军医大学生理学教研室	36	387	10.0	19.0
5	荆清	第二军医大学长海医院心血管内科	18	66	5.0	7.0
9	宋晓伟	第二军医大学长海医院心血管内科	13	39	4.0	5.0
10	许旭东	第二军医大学长海医院心血管内科	11	27	3.0	5.0