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小鼠固醇载体蛋白2原核表达载体的构建与表达纯化
小鼠固醇载体蛋白2原核表达载体的构建与表达纯化
作者:
夏高晓
姜勇
孙明晶
胡水旺
邓鹏
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
固醇载体蛋白类
克隆,生物
基因表达
摘要:
目的 构建小鼠固醇载体蛋白2(SCP-2)融合蛋白表达载体,并在原核细胞内表达及纯化获得具有活性的融合蛋白,为进一步研究SCP-2的生物学功能提供基础.方法 提取BALB/c小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增得到鼠SCP-2编码序列,然后将该编码序列克隆到带有His标记的载体pET14b上,重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达,用镍离子亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性,然后切取分子量正确的条带用SDS-PAGE及质谱技术进行鉴定.结果 重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定证明载体构建正确.融合蛋白表达纯化后获得了分子量约59kD的融合蛋白,符合预期大小,并经质谱分析证明该融合蛋白的表达正确.结论 成功构建了带His标签的SCP-2原核表达载体,并成功表达及纯化出该融合蛋白,为深入研究SCP-2的相关生物学功能提供了一个重要的工具.
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原核表达
蛋白纯化
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文献信息
篇名
小鼠固醇载体蛋白2原核表达载体的构建与表达纯化
来源期刊
解放军医学杂志
学科
医学
关键词
固醇载体蛋白类
克隆,生物
基因表达
年,卷(期)
2010,(10)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
1219-1221
页数
分类号
R746.2
字数
语种
中文
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固醇载体蛋白类
克隆,生物
基因表达
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研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
解放军医学杂志
主办单位:
人民军医出版社
出版周期:
月刊
ISSN:
0577-7402
CN:
11-1056/R
开本:
大16开
出版地:
北京100036信箱188分箱
邮发代号:
2-74
创刊时间:
1964
语种:
chi
出版文献量(篇)
8116
总下载数(次)
11
总被引数(次)
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