pfs基因原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化

• 作者: 孟祥晨 杨杰 胡子毅 赵日红
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: pfs基因 重组质粒 诱导表达 重组蛋白Pfs
• 年，卷（期）: 2015,（14）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 239-243,253
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.14.041

摘要

以植物乳杆菌KLDS1.0391的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增得到pfs基因,与GenBank中的序列对比发现同源性为99％.将目的基因与表达载体pQE-30连接,并将重组质粒pQE-30-pfs转化到E.coli M15中.异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经SDS-PAGE分析,在全菌体蛋白中含有一条明显的特异性蛋白条带,大小约为27.4ku.经Ni-NTA纯化系统纯化后,在SDS-PAGE凝胶电泳图上获得纯化产物的条带.结果表明,原核表达载体pQE-30-pfs构建成功,且Pfs蛋白在大肠杆菌中成功表达,采用Ni-NTA纯化系统成功纯化了重组蛋白Pfs,为体外合成AI-2(Autoinducer-2)奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟祥晨	东北农业大学乳品科学教育部重点实验室	116	913	17.0	25.0
2	胡子毅	东北农业大学乳品科学教育部重点实验室	3	7	1.0	2.0
3	杨杰	东北农业大学乳品科学教育部重点实验室	9	25	3.0	4.0
4	赵日红	东北农业大学乳品科学教育部重点实验室	3	8	2.0	2.0