幽门螺杆菌omp22基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及活性鉴定

• 作者: 段广才 范清堂 郗园林 黄学勇
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 基因工程 高效表达 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 1507-1509
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

[目的]优化幽门螺杆菌omp22基因工程菌(pMAL-c2X-omp22-TB1)的表达条件,并对目的蛋白进行纯化和免疫活性鉴定. [方法]在不同诱导时机、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间下诱导pMAL-c2X-omp22-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量.在优化条件下诱导工程菌表达,采用SDS-PAGE方法对表达产物分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性OMP22蛋白进行分离、纯化,对纯化蛋白做Westem blot分析. [结果]工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0.3mmol/L)诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的25%以上;经纯化得到了较高纯度(>90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性. [结论]建立了从TB1(pMAL-c2X-omp22)可溶性表达产物中纯化较高纯度OMP22融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌高效表达生产工艺的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段广才	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	174	980	15.0	21.0
5	郗园林	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	119	673	13.0	20.0
6	范清堂		38	152	5.0	10.0
7	黄学勇		93	505	10.0	17.0