短小芽孢杆菌XZG33耐高温酸性β-甘露聚糖酶酶学性质研究

• 作者: 侯进慧 唐仕荣 孙会刚 高兆建
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 短小芽孢杆菌 甘露聚糖酶 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2010,（18）
• 页码范围: 9396-9399
• 分类号: Q939.97
• 字数: 4748字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.18.006

摘要

[目的]从短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)XZG33发酵液中分离纯化甘露聚糖酶,并对其酶学性质进行研究.[方法]利用硫酸铵分级盐析、DEAE-cellulose DE52阴离子交换层析和Sephadex G-100分子筛凝胶过滤层析等方法,分离纯化到了均一的蛋白酶,酶纯度提高了39.7倍,回收率20.2%.通过SDS-PAGE电泳和Sephadex G-75分子筛凝胶电泳测得酶蛋白分子量是40.0 kDa,为单亚基蛋白.酶最适作用pH值5.0,最适作用温度60 ℃,在pH值2.0～8.0范围内酶活性及稳定性较高.在80 ℃以下保温1 h,残余酶活还在80.0%以上.二价金属离子Mg2+、Ca2+、Co2+及Mn2+对酶有明显激活作用.酶对槐豆胶有强的底物水解特异性,而对淀粉、羧甲基纤维素钠以及桦树木聚糖水解活性极低.在最适作用条件下,以槐豆胶为底物测定Km为4.6 mg/ml.[结论]鉴于短小芽孢杆菌XZG33甘露聚糖酶具有以上优良的酶特性,它在食品原料及功能性低聚糖的开发方面有着潜在的应用价值.