人DC-SIGN基因表达质粒的构建及其表达

• 作者: 何礼贤 张浩茹 瞿介明 邵长周
• 来源期刊: 国际呼吸杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DC-SIGN 293T细胞 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1169-1173
• 分类号: R394.8
• 字数: 3267字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2011.015.013

摘要

目的 构建含有人DC-SIGN基因的真核表达载体,并在293T细胞中表达目的 蛋白.方法 人血培养获得树突状细胞(DC),以DC的mRNA逆转录cDNA为模板,应用PCR体外扩增获得目的 DNA,用限制性内切酶Sal Ⅰ和BamH Ⅰ分别酶切VRC4409载体和PCR产物,通过连接、转化及克隆的筛选将目的 基因克隆入载体VRC4409,构建载体VRC4409-DC-SIGN,经PCR鉴定及测序分析证实,脂质体介导转染293T细胞,蛋白质印迹分析其表达DC-SIGN蛋白.结果 重组质粒经双酶切和测序鉴定证实VRC4409-DC-SIGN构建成功,DC-SIGN蛋白在293T细胞中成功表达.结论 成功构建质粒VRC4409-DC-SIGN并在293T细胞中表达目的 蛋白,为进一步研究DC-SIGN的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	瞿介明	复旦大学附属华东医院呼吸科	104	832	14.0	24.0
2	何礼贤	复旦大学附属中山医院呼吸科	211	3533	27.0	55.0
3	邵长周	复旦大学附属中山医院呼吸科	44	197	8.0	12.0
4	张浩茹	复旦大学附属中山医院呼吸科	4	4	1.0	2.0