蒙古绵羊Ghrelin基因的克隆和原核表达

• 作者: 凃勇 曹贵方 梁建荣 温世勇 程兰玲 赵鹏伟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: Ghrelin 基因克隆 原核表达 蒙古绵羊
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1782-1786
• 分类号: S826.82|S813.3
• 字数: 3134字
• 语种: 中文

摘要

为了克隆蒙古绵羊Ghrelin基因,构建其原核表达载体,并检测其在大肠杆菌中的表达情况.本研究用RT-PCR方法从蒙古绵羊胃组织mRNA扩增获得Ghrelin基因的cDNA序列,克隆到pMD-19T载体后进行序列分析.将测序正确的cDNA序列与原核表达载体pET-32a(+)连接,并转化BL21( DE3)大肠杆菌.经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot分析.结果表明克隆的蒙古绵羊Ghrelin基因序列与已发表基因序列有2个碱基的差异,该碱基的变化并不影响氨基酸序列,目的蛋白主要以可溶性形式存在,Western-blot初步证实了所获得的融合蛋白是特异的.本研究成功构建了蒙古绵羊Ghrelin基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达,为进一步研究蒙古绵羊Ghrelin基因的功能提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹贵方	内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室	110	300	7.0	11.0
2	程兰玲	内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室	8	5	1.0	1.0
3	赵鹏伟	内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室	14	15	2.0	3.0
4	温世勇	内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室	9	6	1.0	2.0
5	凃勇	内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室	4	6	1.0	2.0
6	梁建荣	内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室	2	2	1.0	1.0