曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 吴威 宫鹏涛 张西臣 徐晓芳 李世杰 李建华 范大为 赵娜
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血吸虫,曼氏 虫卵白细胞介素-4诱导因子 原核细胞 基因表达 包涵体 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1140-1143
• 分类号: R378.2+4|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子(IL-4-inducing principle of schistosoma eggs,IPSE),并制备小鼠多克隆抗体.方法 人工合成IPSE基因,采用PCR技术克隆其成熟体开放阅读框,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-IPSE.转化E coli BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析后,应用组氨酸标签蛋白纯化柱纯化包涵体蛋白,免疫BALB/c鼠,制备多克隆抗体.结果 克隆的IPSE基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100％;重组表达质粒pET-28a-IPSE经PCR及双酶切鉴定证明构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约为16 000,以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30％,可与鼠抗His单抗特异性结合；用纯化的包涵体蛋白免疫BALB/c小鼠后,获得的特异性抗血清效价为2× 10-4,该血清可与IPSE蛋白发生特异性反应.结论 已原核表达、纯化了曼氏血吸虫IPSE蛋白,并制备了高滴度的特异鼠抗血清,为进一步从日本血吸虫中筛选相似蛋白及研究其功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵娜	吉林大学畜牧兽医学院	36	157	9.0	11.0
2	张西臣	吉林大学畜牧兽医学院	211	623	11.0	18.0
3	李建华	吉林大学畜牧兽医学院	302	1731	21.0	33.0
4	宫鹏涛	吉林大学畜牧兽医学院	134	291	8.0	14.0
5	李世杰	吉林大学畜牧兽医学院	15	25	3.0	4.0
9	吴威	吉林大学畜牧兽医学院	16	15	2.0	3.0
10	徐晓芳	吉林大学畜牧兽医学院	4	1	1.0	1.0
11	范大为	吉林大学畜牧兽医学院	3	1	1.0	1.0