新金色分枝杆菌ksdD基因的敲除及其对菌株AD(D)合成的影响

• 作者: 夏海锋 徐美娟 田灵芝 韩冷 饶志明 马正
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: 新金色分枝杆菌 3-甾酮-△1-脱氢酶 ksdD
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 37-42
• 分类号: Q939.97
• 字数: 3292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2011.04.008

摘要

新金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)能将植物甾醇转化为药物中间体4-烯-雄甾-3,17-二酮(AD)和1,4-二烯-雄甾-3,17-二酮(ADD),其中3-甾酮-△1-脱氢酶(KSDD)是AD转化为ADD的关键酶.本实验室在筛菌过程中筛选到一株能将甾醇转化为AD(D)的菌株,经鉴定为M.neoaurum,本研究以该菌株为出发菌株,首先扩增出长度约1.7 kb编码KSDD的 ksdD基因全序列,在基因内部插入一段来源于质粒pET28a的卡那霉素抗性基因(Km),将得到的基因元件ksdD::Km电转化M.neoaurum,通过PCR验证获得稳定遗传的ksdD基因缺失重组转化子.研究结果表明,与原始菌株相比,缺失株KSDD酶活下降了85%,AD产量相比提高了1倍,ADD产量下降了35.2%.该研究证实了ksdD基因编码的3-甾酮-△1-脱氢酶 (KSDD)是AD转化ADD的关键酶,为进一步研究KSDD酶学性质及阐明AD合成ADD的代谢机理奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐美娟	江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	51	125	6.0	9.0
2	马正	江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	3	0	0.0	0.0
3	夏海锋	江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	26	96	5.0	8.0
4	韩冷	江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
5	田灵芝	江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	2	28	1.0	2.0