总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达

• 作者: 周培根 蒋霞云 袁襄南 邹曙明 魏福卫
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲壳素脱乙酰酶 甲壳素脱乙酰酶2基因 cDNA克隆 总状毛霉 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 44-49
• 分类号: Q939.9
• 语种: 中文

摘要

采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列.与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子.总状毛霉cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23 bp 5'端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101 bp 3'端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150～272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域.通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性.本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周培根	上海海洋大学食品学院	21	134	5.0	11.0
2	蒋霞云	上海海洋大学食品学院	33	219	8.0	14.0
3	邹曙明	上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室	34	235	8.0	14.0
4	魏福卫	上海海洋大学食品学院	2	10	1.0	2.0
5	袁襄南	上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室	3	8	1.0	2.0