人Cε3-Cε4基因克隆、表达及纯化复性

• 作者: 刘中成 常斌 张艳芬 时海浪 李雨诗 王培莹 赵丽君
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: Cg3-Cε4 表达 柱上复性
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 134-139
• 分类号: Q78
• 字数: 4347字
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR技术从变态反应疾病患者外周血淋巴细胞中克隆出人Cε3-Cε4基因,将其克隆至原核表达载体pET-17b中,转化大肠杆菌并进行诱导表达,SDS-PAGE后Cε3-Cε4蛋白表达量占细菌总蛋白的30.7％.菌体经裂解、2 mol/L尿素洗涤后,绝大部分杂蛋白被去除,目的蛋白纯度达85.5％.用8 mol/L尿素溶解包涵体,经Ni-NTA柱对变性状态下的目的蛋白进行纯化,并利用降低尿素梯度的方法对纯化的蛋白进行复性,最终目的蛋白纯度为95.3％.Western blotting方法对Cε3-Cε4蛋白进行鉴定,为该蛋白的进一步相关研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳芬	河北大学实验室管理办公室	20	118	3.0	10.0
2	刘中成		2	5	2.0	2.0
3	时海浪		1	3	1.0	1.0
4	赵丽君		1	3	1.0	1.0
5	王培莹		1	3	1.0	1.0
6	常斌		1	3	1.0	1.0
7	李雨诗		1	3	1.0	1.0