利用组成型表达载体pMG36e电转化德式乳杆菌保加利亚亚种的研究

• 作者: 张玉兰 田洪涛 罗云波 谷新晰 郭兴华 郭红敏
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 工学
• 关键词: 德式乳杆菌保加利亚亚种 组成型表达载体 质粒pMG36e 电转化 电转化效率
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 8-16
• 分类号: TS201.3
• 字数: 7722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2011.02.002

摘要

以典型的乳酸菌组成型表达质粒pMG36e为载体,德式乳杆菌保加利亚亚种为受体.采用电转化方法研究受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电转化参数、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响,探讨电转化的最适条件,以提高电转化效率.结果表明:选择含2.5%甘氨酸的SMRS培养基培养受体细胞至对数中期,收获制成感受态细胞,在电场强度12 kV/cm、电阻200Ω、电容25μF条件下电击转化,以含20 mmol/L MgCl2、CaCl2的SMRS培养基复苏培养2 h,涂板筛选得到较高的电转化效率.特别是采用受体菌株修饰的质粒进行电转化,转化效率提高30倍以上,达到6.3×104cfu/μg DNA.本研究结果为进一步构建乳酸菌组成型高效表达系统和食品级基因工程乳酸菌株提供试验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗云波	中国农业大学食品科技与营养工程学院	257	3241	29.0	44.0
2	田洪涛	河北农业大学食品科技学院	102	1161	19.0	29.0
3	张玉兰	河北农业大学食品科技学院	5	74	5.0	5.0
4	郭兴华	中国科学院徽生物研究所	23	160	8.0	12.0
5	郭红敏	河北农业大学食品科技学院	4	54	4.0	4.0
6	谷新晰	河北农业大学食品科技学院	42	131	8.0	9.0