Bcl-2shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

• 作者: 张引成 朱永进 李昂 饶国洲 齐红
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 基因,bcl-2 @慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1281-1284
• 分类号: R73.354
• 字数: 2565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2011.10.003

摘要

目的:应用分子克隆技术,针对人bcl-2目的基因设计3个siRNA靶点和一个阴性对照序列,构建4对shRNA重组慢病毒表达载体,并进行测序验证鉴定.方法:以设计的有效靶序列进行引物合成,将单链引物退火成双链oligo序列,连接入经Age Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切线性化的慢病毒RNA干扰载体中,经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性转化子,采用PCR扩增和DNA测序分别鉴定阳性克隆.结果:PCR扩增产物经凝胶电泳后阳性克隆得到335bp条带,阴性克隆得到298 bp条带,DNA测序结果证实其含有设计合成序列.结论:成功构建4对bcl-2shRNA重组慢病毒表达载体,为研究靶向bcl-2 siRNA对肿瘤细胞增殖抑制与诱导凋亡作用及基因治疗研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂		81	451	12.0	17.0
2	张引成		46	240	6.0	13.0
3	齐红		20	43	4.0	5.0
4	饶国洲		64	326	9.0	14.0
5	朱永进		14	55	4.0	7.0