阪崎肠杆菌实时荧光双重TaqMan PCR快速检测体系的建立

• 作者: 叶长芸 孟双 李娟 王艳 白雪梅
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 阪崎肠杆菌 实时荧光TaqMan PCR 外膜蛋白A 内部转录间隔区
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 857-860
• 分类号: R378.2
• 字数: 3774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.10.001

摘要

目的 建立针对阪崎肠杆菌的高灵敏、高特异的实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应(PCR)快速检测体系.方法 根据阪崎肠杆菌基因组16S rRNA～23S rRNA的内部转录间隔区(ITS)基因和外膜蛋白A(OmpA)基因的特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用高通量实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的灵敏度;用50种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性.结果 实时荧光双重TaqMan PCR快速检测体系对阪崎肠杆菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系；对阪崎肠杆菌基因组的检测灵敏度为4×10-1 pg/反应体系;该检测体系在检测50种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现特异性扩增,整个反应在2h内完成.结论 本研究建立的实时荧光双重TaqMan PCR检测体系可作为阪崎肠杆菌灵敏、特异、快速的检测方法,并同时检测阪崎肠杆菌的致病力.