GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

• 作者: 佟宇鑫 刘彤 李丹妮 李慧 袁正伟 顾卉
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: LMO1 截短突变体 质粒 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 961-963,978
• 分类号: Q257
• 字数: 2315字
• 语种: 中文
• DOI: 21-1227/R.20111128.1734.001

摘要

目的 构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST-LMO1全长及各个截短突变体融合蛋白的表达.结论 成功构建了LMO1全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LMO1结构与功能的研究提供了前提基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李慧	中国医科大学附属盛京医院实验研究中心	97	422	11.0	15.0
2	袁正伟	中国医科大学附属盛京医院实验研究中心	68	191	7.0	11.0
3	顾卉	中国医科大学附属盛京医院实验研究中心	13	17	3.0	3.0