GST-Fank1融合蛋白表达载体构建及表达纯化的研究

• 作者: 刘佳 杨葳 郑志红 黄华亮
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Fank1 融合蛋白 谷胱甘肽S-转移酶
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 101-103
• 分类号: R339.2
• 字数: 1981字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究转录因子Fank1与GST融合蛋白原核表达栽体的构建和表达.方法 根据Fank1基因的DNA序列,经引物设计软件Primer Premier 5.0优化设计出上下游引物(Ⅰ,Ⅱ),同时在5'端引入BamH Ⅰ酶切位点,3'端引入Sal Ⅰ酶切位点.以pdsRED-Fank1质粒为模板进行PCR扩增Fank1目的 片段,经限制性内切酶酶切后连接到原核表达载体pGEX4T-2,构建成pGEX4T-2-Fank1原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3),通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导进行目的 蛋白表达.结果 经菌液PCR、电泳分析及测序证明成功构建了Fank1融合表达载体,融合蛋白产物经蛋白印迹显示,相时分子量为43 kDa的蛋白条带,与预期一致.结论 成功构建了pGEX4T-2-Fank1原核表达载体,并在原核细胞中有表达,为进一步研究转录因子Fank1的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘佳	中国医科大学实验动物部	55	151	6.0	9.0
2	郑志红	中国医科大学实验动物部	57	222	8.0	13.0
3	杨葳	中国医科大学实验动物部	29	100	6.0	8.0
4	黄华亮	中国医科大学实验动物部	1	1	1.0	1.0