结核杆菌CFP-10蛋白的原核表达、纯化及抗血清制备

• 作者: 吴秀丽 房明丽 杨明 王丽颖 颜游游
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核病 CFP-10 T细胞抗原 抗血清
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1002-1005
• 分类号: R392.11
• 字数: 3446字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.11.010

摘要

目的:获得原核表达及纯化结核杆菌CFP-10蛋白及其抗血清.方法:从H37RV结核杆菌基因组中扩增得到CFP-10的编码基因,通过原核表达系统(BL21-pET28a+)表达及镍亲和层析和Q sepharose阴离子交换层析获得内毒素合格的CFP-10蛋白.将此蛋白免疫家兔,获得抗CFP-10的抗血清,并通过间接ELISA的方法检测其抗体滴度.结果:重组质粒pET28a-CFP-10构建成功,其编码的蛋白在BL21中获得了高效表达,且经纯化获得了内毒素合格的CFP-10蛋白,免疫家兔获得的抗血清效价能达到1∶256 000.结论:成功的表达及纯化了CFP-10蛋白,并制备了高滴度的CFP-10抗血清,为临床血清学检测以及新型结核疫苗研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽颖	吉林大学白求恩医学院分子生物学系	82	282	9.0	13.0
2	房明丽	吉林大学白求恩医学院分子生物学系	7	22	3.0	4.0
3	杨明	吉林大学白求恩医学院免疫学系	49	171	7.0	9.0
4	吴秀丽	吉林大学白求恩医学院分子生物学系	27	81	4.0	8.0
5	颜游游	吉林大学白求恩医学院免疫学系	3	0	0.0	0.0