人核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及其体内外抗瘤效应研究

• 作者: 于培霞 兰晶 王桂琴 邓志华
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人核心蛋白聚糖 抗瘤效应 细胞周期 凋亡 基因治疗
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 专稿
• 页码范围: 697-703
• 分类号: R73-36
• 字数: 1361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1007-6611.2011.09.001

摘要

目的 构建人核心蛋白聚糖(human decorin,hDCN)pcDNA3.1(+)真核表达载体,并探讨其对S180细胞在体内、体外的抗肿瘤效应及其作用机制.方法 用PCR法从pPIC9K-DCN扩增hDCN核心蛋白分子编码序列的全长cDNA,与pcDNA3.1(+)载体连接.将重组pcDNA3.1(+)- DCN质粒通过脂质体转染法转入小鼠肿瘤细胞S180中,用G418筛选出阳性克隆细胞,RT-PCR、双酶切及测序鉴定.流式细胞仪对转染了重组质粒pcDNA3.1(+) - DCN、空质粒pcDNA3.1(+)的S180细胞和未转染的S180细胞进行细胞凋亡检测和细胞周期分析.分别注射等量的pcDNA3.1(+) - DCN/S180、pcDNA3.1(+)/S180的细胞和未转染质粒的S180细胞到随机分组的小鼠腋部皮下,观察三组小鼠的肿瘤生长情况;处死三组小鼠后,分别剥离肿瘤组织做病理学检查.结果 转染了DCN的S180细胞凋亡指数明显增高,G0/G1期细胞百分率明显高于其他两组,G2/M期、S期细胞百分率分别明显低于其他两组(P<0.01).与注射pcDNA3.1(+)/S180和S180的小鼠相比,注射pcDNA3.1(+) - DCN/S180的小鼠肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤体积小于其他两组(P<0.01).结论 成功构建了人核心蛋白聚糖真核表达载体.体外实验结果 显示转染该表达载体的S180细胞凋亡指数明显增高,且凋亡多发生在G0/G1期;转染DCN表达载体的S180细胞在实验动物体内成瘤性降低,提示转染DCN在实验动物体内外都能表现抑瘤效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于培霞	山西大医院检验科	5	13	2.0	3.0
2	王桂琴	山西医科大学微生物学免疫学教研室	82	302	9.0	12.0
3	邓志华	山西医科大学第二临床医学院消化科	60	155	6.0	8.0
4	兰晶	军事医学科学院微生物学流行病学研究所	3	14	3.0	3.0