表达荧光素酶报告基因稳定细胞系的建立及对CBLB502活性的检测

• 作者: 杨晓明 汤立宣 王治东 葛常辉 许望翔
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光素酶类 NF-κB 潮霉素B
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 310-313
• 分类号: R345|R392.11
• 字数: 3199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2011.04.003

摘要

目的 建立表达NF-κB-RE-luc2P荧光素酶报告基因的稳定细胞系以检测CBLB502的活性.方法 利用脂质体转染试剂Lipofectin2000将含有NF-κB报告基因的质粒NF-κB-RE-luc2P转染入人胚肾细胞(HEK293细胞),并通过潮霉素B进行克隆筛选,最后挑取单克隆进行放大并应用荧光素酶检测方法进行鉴定.结果 经200 μg/ml的潮霉素B筛选,得到所需要的单克隆株,鉴定并保存.应用该潮霉素抗性单克隆细胞系对基于NF-κB信号通路的新型抗辐射蛋白药物CBLB502活性的检测显示出良好的量效关系.结论 本实验通过Lipofectin2000转染法并在潮霉B筛选成功培育出稳定表达NF-κB报告基因活性的HEK293细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓明	军事医学科学院放射与辐射研究所	88	536	11.0	19.0
2	许望翔	军事医学科学院放射与辐射研究所	20	154	6.0	12.0
3	葛常辉	军事医学科学院放射与辐射研究所	10	24	3.0	4.0
4	王治东	军事医学科学院放射与辐射研究所	25	87	6.0	8.0
5	汤立宣	安徽医科大学病理生理学教研室	1	0	0.0	0.0