含uPA裂解位点的人sTrail融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化

• 作者: 戴晓天 梁宇佳 熊玮 缪殿南 闫国和
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 克隆 融合基因 融合蛋白 抗原性
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 789-792
• 分类号: R394-33|R394.3
• 语种: 中文

摘要

目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTrail)基因的原核载体,表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA.方法 RT-PCR法克隆sTrail基因后,经引物延伸法构建his-uPA-sTrail融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中,诱导其表达蛋白并将其纯化,肠肽酶(enterokinase,EK)切与再次纯化回收该蛋白,Western blot检测其抗原性.结果表达载体经诱导成功获约38×103含载体表达标签(Trx)的融合蛋白,EK酶切该蛋白获约19.5 ×103的目的蛋白uPA-sTrail.检测表明,该目的蛋白具人Trail抗原性.结论成功克隆uPA-sTrail融合基因并构建至原核表达载体,并获约19.5×103的融合蛋白,且该蛋白具人Trail抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴晓天	第三军医大学西南医院呼吸内科	59	330	8.0	16.0
2	熊玮	第三军医大学西南医院呼吸内科	76	547	12.0	20.0
3	闫国和	第三军医大学西南医院呼吸内科	9	151	3.0	9.0
4	梁宇佳	第三军医大学西南医院呼吸内科	1	4	1.0	1.0
5	缪殿南	第三军医大学西南医院呼吸内科	1	4	1.0	1.0