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幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组体的构建及其表达鉴定
幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组体的构建及其表达鉴定
作者:
刘志杰
周秀萍
李秀萍
邱宏
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
幽门螺杆菌
真核表达重组体
Lpp20
摘要:
目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)Lpp20基因的真核表达重组体,并鉴定其在Hela细胞中能否有效表达,为进一步开展Lpp20核酸疫苗与该蛋白的生物学功能的研究打下基础. 方法 抽提Hp标准菌株26695基因组DNA,应用聚合酶链式反应(PCR)技术从基因组DNA扩增Lpp20基因,经过一系列酶切、连接反应将其克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+),转人大肠杆菌,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应鉴定;用脂质体法将构建好的重组载体pcDNA3.1(+)- Lpp20转染Hela细胞,通过免疫细胞化学法及Western印迹法检测其在Hela细胞中表达的Lpp20蛋白. 结果 成功扩增出长约528bp的Lpp20基因,测序结果表明扩增出的Lpp20基因与HpLpp20序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实Lpp20基因正确克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+),并经免疫细胞化学法和Western印迹法检测到重组体可在Hela细胞中有效表达. 结论 成功构建了Lpp20基因的Hp真核表达重组体,并检测到其在Hela细胞中可表达出免疫反应性良好的蛋白,为进一步探索其免疫作用及生物学功能奠定了基础.
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篇名
幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组体的构建及其表达鉴定
来源期刊
实用预防医学
学科
医学
关键词
幽门螺杆菌
真核表达重组体
Lpp20
年,卷(期)
2011,(9)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
1619-1622
页数
分类号
R379.9
字数
3883字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1006-3110.2011.09.007
五维指标
传播情况
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引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
幽门螺杆菌
真核表达重组体
Lpp20
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
实用预防医学
主办单位:
中华预防医学会
湖南省预防医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1006-3110
CN:
43-1223/R
开本:
大16开
出版地:
长沙市芙蓉中路一段450号
邮发代号:
42-192
创刊时间:
1994
语种:
chi
出版文献量(篇)
13616
总下载数(次)
21
总被引数(次)
74978
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