密码子优化的肺炎支原体P1蛋白在大肠杆菌中的克隆表达

• 作者: 修冰水 宋晓国 张奇舒 张贺秋 谢宝贵
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎支原体 P1黏附蛋白 优势密码子 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 380-382,392
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 2614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.03.016

摘要

目的:获得密码子优化的肺炎支原体P1黏附蛋白优势表位抗原基因,并在大肠杆菌中表达,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础.方法:采用生物信息学分析肺炎支原体P1蛋白的抗原表位,筛选特异性P1蛋白优势表位区；采用大肠杆菌优势密码子,设计上述P1蛋白优势表位基因序列；采用退火PCR技术合成上述基因,并利用载体pGEX-4T-2实现P1优势表位抗原在大肠杆菌中的表达；采用ELISA法对纯化的P1抗原活性进行测定.结果:肺炎支原体P1蛋白特异性抗原表位主要位于1154-1521 aa,获得的P1优化密码子基因平行突变37个稀有密码子和2个终止密码子；在大肠杆菌中表达的GST-P1融合蛋白的相对分子质量为65.9×103,纯化后重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性的免疫反应.结论:采用密码子优化基因合成技术实现了肺炎支原体P1优势表位抗原在大肠杆菌中的高效表达,为肺炎支原体感染的诊断试剂研究提供了重要参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋晓国	军事医学科学院基础医学研究所	45	289	10.0	16.0
2	张贺秋	军事医学科学院基础医学研究所	79	374	10.0	16.0
3	谢宝贵	福建农林大学菌物研究中心	186	1536	20.0	28.0
4	修冰水	军事医学科学院基础医学研究所	31	64	4.0	6.0
5	张奇舒	福建农林大学菌物研究中心	2	5	1.0	2.0