改良型TAT-VP3融合蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 丁明霞 刘靖宇 张之甲 李俊 李宁 王伟 王剑松 詹辉 颜汝平
• 来源期刊: 现代泌尿生殖肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白 蛋白纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 90-93
• 分类号: R318.16
• 字数: 3198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.jssn.1674-4624.2012.02.008

摘要

目的 表达、纯化改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备其多克隆抗体.方法 利用原核表达载体PGEX-6P-1/改良型TAT-VP3在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,经GST标签纯化树脂纯化蛋白,并用PreScission Protease酶切除标签,以纯化的蛋白免疫新西兰大白兔,获得改良型TAT-VP3融合蛋白的多克隆抗体.用ELISA进行效价检测,Western blotting鉴定其特异性.结果 诱导表达并纯化了改良型TAT-VP3融合蛋白,纯度大于90%,蛋白浓度为1.2 mg/ml.制备了该蛋白的多克隆抗体,ELISA表明多克隆抗体效价为1∶32 000,Western blotting证明多克隆抗体的特异性良好.结论 成功纯化出改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备出高效价、高特异性的多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的体内外抗肿瘤活性及作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王剑松	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	102	251	8.0	12.0
2	李俊	昆明医科大学第一附属医院肾内科	64	257	8.0	14.0
3	丁明霞	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	16	16	3.0	3.0
4	王伟	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	17	22	3.0	4.0
5	颜汝平	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	16	60	4.0	7.0
6	刘靖宇	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	7	11	3.0	3.0
7	詹辉	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	8	20	2.0	4.0
8	张之甲	昆明医科大学第二附属医院泌尿外科	1	1	1.0	1.0