苋菜AmPCS基因的克隆及表达载体构建

• 作者: 周卫 孙静文 梁国庆 王秀斌 程明芳
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苋菜 植物络合素 克隆 AmPCS基因 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 页码范围: 44-49
• 分类号: Q78
• 字数: 4700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.02.009

摘要

合成植物络合素(PCs)是高等植物减轻重金属毒害的重要机制.通过对镉超积累苋菜品种天星米植物络合素合成酶基因(PCS)的克隆及表达载体构建,旨在为植物修复镉污染土壤奠定基础.依据同源克隆原理,通过RTPCR和RACE方法克隆苋菜PCS基因.序列分析表明:苋菜PCS基因eDNA全长1 770 bp,包含完整的阅读框,编码485个氨基酸；苋菜PCs合成酶与拟南芥、遏蓝菜、芥菜及油菜PCs合成酶相似性为91.96％ -95.67％,其氨基酸序列N端有1个Pfam:Phytochelatin结构域(功能为催化合成植物络合素)、C端有1个Pfam:Phytochelatin_C结构域(功能为重金属离子感应器).因此,推断苋菜PCS基因编码蛋白是PCS-like家族的新成员,具有催化合成植物络合素的功能,将它在GenBank注册,序列号为:JN979370,命名为ArnPCS.在AmPCS基因的编码区加入BamH Ⅰ和Sac Ⅰ酶切位点,双酶切植物表达载体pBI-121和带有酶切位点的PCR产物,成功获得苋菜PCS基因正义表达载体pBI-PCS.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周卫	中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业部植物营养与肥料重点实验室	40	1819	25.0	40.0
2	王秀斌	中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业部植物营养与肥料重点实验室	14	860	10.0	14.0
3	程明芳	中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业部植物营养与肥料重点实验室	21	1041	15.0	21.0
4	梁国庆	中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业部植物营养与肥料重点实验室	11	582	10.0	11.0
5	孙静文	中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业部植物营养与肥料重点实验室	6	129	5.0	6.0