大豆GmGBP1基因的原核表达及重组蛋白纯化

• 作者: 刘丽雪 卢清瑶 宋仙萍 张彦威 李文滨 谷月娇 赵琳
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 SKIP 原核表达 包涵体 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 874-877
• 页数: 4页
• 分类号: S565.1
• 字数: 2803字
• 语种: 中文

摘要

将大豆中已克隆的一个新的SKIP基因(GmGBP1)构建到原核表达载体pGEX-6p-1上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,对其进行IPTG诱导.结果表明:在IPTG浓度为0.1 mmol·L-1,诱导时间为8h,诱导温度为37℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为95 kDa,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用8 mol·L-1尿素对其进行溶解后经GST柱纯化,得到较好的纯化效果.